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本生闡述:ELISA方法如何檢測帶抗體的相關(guān)指標
更新時間:2023-07-18瀏覽:776次

  本生闡述:ELISA方法如何檢測帶抗體的相關(guān)指標


  在運用ELISA方法測定抗體方面,通常所用的方法稱為間接法,也是目前常用的方法,其原理:間接法首先用抗原包被于固相載體,這些包被的抗原必須是可溶性的,或者至少是極微小的顆粒,經(jīng)洗滌,加入含有被測抗體之標本,再經(jīng)孵育洗滌后,加入酶標記抗抗體,(對人的標本來說即加酶標抗人球蛋白IgG、IgM),再經(jīng)孵育洗滌后,加底物顯色,底物降解的量,即為欲測抗體的量,其結(jié)果可用目測或用分光光度計定量測定。


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  ELISA試劑盒操作步驟:

  1. 將抗原按5μg/ml稀釋于碳酸鹽緩沖液(pH 9.6),100μl /孔,4℃過夜。

  2. 次日PBS-T清洗4次(快1慢3,間隔5分鐘)。

  3. 加2%BSA封閉室溫1h,200μl /孔。

  4. 陽性對照從10ug/ml,做倍必稀釋,待測血清從1:50做倍比稀釋,預試驗后確定稀釋倍數(shù)及陽性對照的起始濃度及稀釋數(shù)量(以可以做標準曲線為參數(shù)),室溫1h。

  5. PBS-T清洗4次(快1慢3,間隔5分鐘)。

  6. 加入1:3000(不同公司有不同的推薦稀釋度)PBS-T稀釋的HRP標記的山羊抗人IgG,100μl /孔,室溫1h。

  7. PBS-T清洗4次(快1慢3,間隔5分鐘)。

  8. 顯色,100μl /孔,顏色變深后中止顯色,2M硫酸在BIO-RAD酶標儀上讀數(shù),可用ABTS,OPD,TMB等。

  ELISA試劑盒 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業(yè)精神作為標準,以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。

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